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胎牛血清中出现黑点的原因及预防方法
发布时间:2018-11-27   点击次数:72次
      胎牛血清的细胞培养中出现黑点的原因及预防方法:
  一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。
  如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:
  (1)细胞生长过老,破碎的细胞残骸;
  (2)血清质量不好,反复冻融的结果;
  (3)配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;
  (4)配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;
  (5)培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。
  2. 细胞培养中如何防止黑点生成?
  (1) 尽可能地减少血清冻融次数。
  (2) 培养基无需37℃水浴。
  (3) 培养基保持PH值7.0- 7.2。
  (4) 严格控制配制培养基的水质,容器定期刷洗。
  (5) 掌握细胞传代的时机,细胞切勿生长过老。

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