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如何选择合适的细胞培养基?
发布时间:2019-01-14   点击次数:150次

近几年,动物细胞培养技术已经扩展到生物学研究和商业生产的许多方面,成为广泛采用的技术手段,而在细胞培养发展历史中,细胞培养基的发展占有重要的位置。那么对于细胞培养基的发展以及如何选择出合适的细胞培养基,你知道吗?

细胞培养基发展史

1、天然细胞培养基阶段

人们早期的细胞培养基,直接采用某些组织凝块,动物组织提取液或体液,如血浆凝块、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。

1885年Roux用温生理盐水培育鸡胚组织,使之存活数天,这是记录早的组织培养。

1907年美国胚胎学家Harrison在无菌环境下以淋巴液为培养基培养蛙胚神经成功,创立了体外培养方法。

此后科学家陆续开展了对于维持细胞生长的营养成分的研究,由于当时的条件限制,并没有稳定的发展起来,但这些为合成细胞培养基阶段打下了一定的基础。

 

 

2、合成细胞培养基阶段

合成细胞培养基化学成分明确,组分稳定,主要包括糖类、必需氨基酸、维生素、无机盐类等,它是根据已知细胞所需的营养物质严格配制的。

早的是1950 年的199 细胞培养基,至今合成细胞培养基发展已有几十种,除了沿用半个世纪的基础合成细胞培养基之外,近年来还出现了营养成分更加丰富的低血清细胞培养基。

在动物细胞培养中常用基础细胞培养基有6~7 种,如BME、MEM、DMEM、HAM F12、PRMI1640、199 等。

由于天然培养基的一些营养成分不能被合成细胞培养基完全代替,因此一般需在合成细胞培养基中添加5%~10%的小牛血清。小牛血清的加入对细胞培养非常有效,但小牛血清的成分复杂,这对培养产物的分离纯化和检测会带来一定的不便。

3、无血清细胞培养基阶段

血清对于在传统培养基配方中生长和增殖的大多数细胞系来说是必不可少的。然而,伴随血清的使用也带来了很多的问题。在合成细胞培养基的基础上,在使用中不添加血清的细胞培养基,且其组成成分不含有任何动物组分,使培养基既能满足细胞培养所需的营养,又能避免血清带来的问题。

无血清细胞培养基按照其组分分类,还可以分为无动物组分无血清细胞培养基和化学限定无血清细胞培养基,前者组分中可能含有某些植物来源成分,而后者完全由化学成分明确的组分组成。

目前许多公司都针对特定的细胞开发出一系列的无血清细胞培养基,例如弗元生物的干细胞培养基,为研究人员更好的开展相关研究带去了便利。

细胞培养基的作用

细胞培养基是细胞培养的基础,它为动物细胞的健康快速成长提供营养物质。所以只要用到细胞来制造生物技术产品,细胞培养基的重要作用就无可替代。

细胞培养基的主要成份是水、氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助营养物质。传统的合成细胞培养基会添加一定量的血清,低血清细胞培养基或是无血清细胞培养基则在合成细胞培养基的基础上,通过调整营养成份配比或含量,或者添加一些血清替代因子。

细胞培养基含有充分的营养物质,满足完成新细胞合成、细胞代谢等生化反应所需要的物质和能量。另外为合适的细胞培养基pH 、缓冲能力、渗透压 、粘滞性及表面张力也是细胞正常生长发育的关键。

如何选择合适的细胞培养基

目前市面上的培养基种类非常丰富,生产厂家五花八门。在开展细胞实验前,对于细胞培养基的选择,有些朋友可能比较苦恼。那么在这点上,我们到底要怎么做呢,下面给大家分享一下我的方法。

对于购买的新细胞株,可以要求出售单位提供合适培养基信息。

一些特定的实验所需细胞,可以根据细胞株的特点和实验需求查阅文献,参考别人的经验,选择适合的培养基。

如果没有相关文献支持,可以选择多种培养基共同培养目的细胞,观察其生长状态,做一些生长曲线或集落形成等指标,根据这些选择合适的培养基。

对于重要的实验,在选择细胞培养基上,可以选择一些口碑较好的公司所产的培养基,或者是目的细胞出售单位配套的培养基,一般这样可以避免由于培养基质量问题带来的实验误差,给实验的顺利进行奠定基础。

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