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怎么调整人ELISA试剂盒试验的对策
发布时间:2020-03-05   点击次数:67次

ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在科研上得到了广泛的使用,但操作中的各个环节对试验的检测作用影响较大,人ELISA试剂盒如不留意,有或许导致显色不全、花板等结果。 

    
一.下面将操作中各个环节常出现问题解决办法总结于下:
     
1.挑选试剂: 挑选质量优良的检测试剂,严厉按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
    
2.标本收集与保存: 防止使用肉眼可见的溶血标本、高脂标本和混浊标本;2-8℃下,标本可放置24-48小时,长时间保存需放置-20℃下。请防止重复冻融。

二.人ELISA试剂盒具体请参照: 
     
1.试剂使用中的预备工作及留意事项
 
2.试剂盒中会有提示,一般需要预备的有: 洗涤液;用前制造;有的试剂盒会标明,配好的4度下一般可以放一个月;假如没有标明,尽量用新鲜的,不要多制造。显色液(有A液和B液的),用前15分钟制造
 
3. 规范品:有的试剂盒中规范品是现已制造好的,4度保存;有的是要现制造的;按照说明书操作,浓缩生物素结合的二抗和HRP:假如需要制造,试剂盒没注明配好可以保存多久的话,尽量现配现用(用前15分钟制造) 
     
4.原则是:试剂盒上没有指出制造物的贮藏方法的话,应该现配现用;不要怕麻烦;还有小瓶的管子开盖前要离心,以免盖子上粘连今后总量不行
    
5.加 样:室温温育的试剂,特别是温育时间比较短的试验操作的试剂,加样对数据的影响比较大,特别要留意加样问题 
 
三.欠好的操作原因:

1.不会正确使用加样器
    
2.血清或血浆标本分离欠好即进行加样
     
3.人ELISA试剂盒手工操作中,加样板过多形成加样後放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)
    
4.加完标本再加酶试剂时酶溅起孔外

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