18321664727
返回首页 在线留言 联系我们
首页 > 技术支持 > 石蜡组织切片制作全过程的注意事项

技术支持

石蜡组织切片制作全过程的注意事项
更新时间:2020-06-05   点击次数:735次

(一)石蜡切片注意事项

(1)组织脱水、透明和浸蜡  在脱水过程中,所用各级酒精的纯度应尽量保持,以便将组织内的水分*脱去。在*中的时间不宜过长,以防组织过硬,造成切片不顺畅。如果*中含有水分,则组织脱水不*。这种含有水分的组织二甲苯不能*浸入,造成切片无法透明而呈现混浊现象。此时可将组织重行在新*中脱水。透明所用二甲苯应保持纯度,否则透明难以充分,不利于石蜡渗透。组织在二甲苯中的时间需要严格掌握,时间过长则组织脆硬易碎,时间过短石蜡不易浸入。因为透明所需时间较短,所以透明时间必须注意。浸蜡的温度不可以过高,一般应调节在54~56℃。温度过高时会使组织变脆。浸蜡时间应适当严格控制。

(2)包埋  石蜡温度不可过高,以防烫伤组织。所用镊子也不可烧得过烫,以免在取组织时灼伤组织,造成切片制成后的不良后果。包埋时应根据观察需要而选择组织块摆放方向。

(3)石蜡切片  切片刀要锋利,否则切片时会自行卷起,导致不能顺利将切片切成连续的条带状。切片刀如有缺口存在,切片会断裂、破碎和不完整。切片机各个零件和螺丝应旋紧,否则产生震动可导致切片厚薄不均。在摇动切片机时用力要均匀,避免震动。遇有较硬的脑、肝脏、脾脏等组织时,应轻摇切片,以防组织由于震动而形成空洞现象。切片刀放置角度以200~300为好。过大则切片上卷,不能连接一起,过小则切片皱起。

 



(二)染色时注意事项

(1)作为染料的溶媒主要是蒸馏水和酒精,以蒸馏水为多。采用浓度较稀的染色液时,组织切片要经过较长时间的浸染才可以得到满意的染色效果。如果组织切片不易着色,可采用浓度较高的染色剂。染色剂pH与染色作用关系密切。染液或试剂有沉淀,用前应过滤。

(2)组织切片的脱蜡应*,否则染色效果不好,染色时间的长短需根据染色液对组织的染色作用、染色时的室温条件、切片的厚薄、固定液的类别以及染色液的新旧等有所变异,染色时可使用显微镜观察染色程度。一般增高温度可促进染色,冬季室温低时需加温。

(3)分化是染色成败的关键。分化不当会引起染色不均、过淡或过深等现象。因此有必要在显微镜下观察来进行控制。组织切片脱水、透明等步骤必须*,否则切片呈云雾状。

(4)组织切片封固时,应注意中性树胶的浓度,以能滴下成珠为好,如果过稀则易于溢出盖玻片,而且二甲苯挥发后的组织切片会因树胶收缩而产生气泡;如果过浓则在加上盖玻片后,树胶不易散开,出现气泡时不易除去。

封固组织切片时,切片上可剩余适量二甲苯,过多或过少均可引起封固时产生气泡。若切片见有少数气泡时,可用眼科小镊子轻压消除。树胶封固时要注意避免口、鼻呼出气体接触到载玻片,否则切片呈云雾状。在潮湿的环境里,封固动作必须快速。树胶不要滴得过多,以免溢出盖玻片,但太少又不能到达盖玻片边缘。

(5)组织切片在染色前应遮盖保存,以防灰尘落入。染后的切片应妥善保存,避免日光照射而褪色。在染色过程中,组织切片偶有脱离玻片现象,原因如下:载玻片不清洁;附片时的水温过低;烤片时间不足或烤片温度不够而急于染色;组织块脱水不好,影响后续的浸蜡和切片过程;组织过干或过硬,难切成片;浸蜡时间过长可致组织硬脆。

分享到:

返回列表 | 返回顶部
上一篇 : 胎牛血清与新生牛血清区别在哪?    下一篇 :  ELISA试剂盒生产流程及注意事项
网站首页 公司简介 产品中心 招聘中心 技术支持 企业动态 联系我们 管理登陆
上海古朵生物科技有限公司版权所有 主营:优质胎牛血清,EA36染色液配制,迪夫快速染色液
GoogleSitemap ICP备案号:沪ICP备19048203号-2 技术支持:智慧城市网
在线客服