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MS培养基配置培养液时需注意哪些要点?
更新时间:2021-03-25   点击次数:400次
  MS培养基是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。培养基的成分是根据植物生长发育所需的营养而设计的。它既有植物所需的氮、磷、钾及锌、铜、钼、铁等元素,同时也包含了对生长发育起促进和调节作用的有机物质及植物激素等。
 
  MS培养基配制培养液时应注意:
 
  ①在使用提前配制的母液时,应在量取各种母液之前,轻轻摇动盛放母液的瓶子,如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染,应立即淘汰这种母液,重新进行配制;为防止母液被微生物污染,有机母液放在冰箱里4℃保存;
 
  ②用量筒或移液管量取培养基母液之前,必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次;
 
  ③量取母液时,建议将各种母液按将要量取的顺序写在纸上,量取1种,划掉1种,以免出错。溶化琼脂 用粗天平分别称取琼脂9 g、蔗糖30 g,放入1 000 mL的搪瓷量杯中,再加入蒸馏水750 mL,用电炉加热,边加热边用玻璃棒搅拌,直到液体呈半透明状。然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中,然后加蒸馏水定容至1 000 mL,搅拌均匀。
 
  需要注意的是,在加热琼脂,制备培养基的过程中,操作者千万不能离开,否则沸腾的琼脂外溢,就需要重新称量、制备。此外,如果没有搪瓷量杯,可用大烧杯代替。但要注意大烧杯底的外表面不能沾水,否则加热时烧杯容易炸裂,使溶液外溢,造成烫伤。调pH 用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培养基中,边滴边搅拌,并随时用pH试纸测培养基的pH,一直调到培养基的pH为6(5.8~6.5)左右为止。培养基的分装 溶化的培养基应该趁热分装。分装时,先将培养基倒入烧杯中,然后将烧杯中的培养基倒入锥形瓶(50 mL或100 mL)中。注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上。锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶容量的1/5~1/4。每1 000 mL培养基,可分装25~30瓶。培养基分装完毕后,应及时封盖瓶口。用2块硫酸纸(每块大小约为9 cm×9 cm)中间夹1层薄牛皮纸封盖瓶口,并用线绳捆扎。然后在锥形瓶外壁贴上标签。

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