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看完这篇文章,瞬间了解大肠杆菌蛋白表达载体了
更新时间:2021-08-26   点击次数:236次
  大肠杆菌蛋白表达载体是基因表达技术中发展较早、应用较广且较为经济实惠的经典表达系统。利用该系统表达重组蛋白具有许多优越性:细胞遗传背景清楚、目的基因表达水平高、培养周期短、纯化方便、稳定性好、抗污染能力强、易于放大和适用于多种属蛋白的表达。但是仍然存在着表达量低、蛋白活性低、易形成包涵体和含有内毒素等问题。
 
  大肠杆菌蛋白表达载体的性能特点:
 
  1. 代谢途径和基因表达调控机制比较清楚
 
  1) 全基因组测序,共有4405个开放性阅读框架;
 
  2) 基因克隆表达系统成熟完善;
 
  3) 繁殖迅速,培养简单,操作方便,遗传稳定。
 
  2. 培养周期短
 
  1) 大肠杆菌繁殖能力强,在营养条件充足时,20~30mins即可繁殖一代;
 
  2) 大规模发酵成本低,具有巨大的生存潜力。
 
  3. 目标基因表达水平高
 
  表达水平较一般真核表达系统高,某些外源基因在大肠杆菌中的表达量可达总蛋白的5%~30%。
 
  4. 遗传背景清楚
 
  1) 对大肠杆菌的遗传背景和生理特性研究相当清楚,已有多种不同的抗药性、不同营养缺陷型和不同校正突变型的菌株供选择使用;
 
  2) 可以根据不同的载体而选择不同的菌株。
 
  5. 抗污染能力强,下游工艺简单,易于控制。
 
  6. 已有大量可供选择利用的表达载体,被FDA批准为安全的基因工程受体菌。

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