Gibco胎牛血清新西兰中的悬浮物问题解答

　　1.血清的灭活

　　1、问：发现培养的细胞瓶中背景有许多的小黑点，培养液中也有一些漂浮的物。看了之前的帖以为是胶原虫。本打算换液，换液前特意看了下前些天配的培养液，肉眼发现培养液中有悬浮的颗粒状物质(不多)，于是放在镜下观察，新鲜培养液中有一些悬浮的小颗粒，不多。(培养液是R1640+20%Gibco小牛血清+1%双抗)于是又将分装在4℃保存的小牛血清拿出观察，肉眼可见5、6个白色小小球状的物质，在血清瓶稍靠下的部位悬浮。镜下观察，也有少量的不知什么物质的东西漂浮。小牛血清是Hyclone新西兰的，标签上写已经经过2μm滤膜过滤处理。根据上述培养液的情况，是否说明培养液已被污染?如果是正常的血清是不是在镜下不应该看到杂物，哪怕是极少量的?根据上述血清的描述，是不是说明血清也存在问题，还能用吗?补充：细胞培养以来生长状态就不好。买血清的时候厂家说明不用灭活，所以未灭活。

　　答：

　　(1)Gibco血清应该-20℃保存，解冻血清时，请按照的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大实验显示非常容易产生沉淀物。

　　(2)Gibco澳洲血清10099141中沉淀物的出现有许多种原因，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成，而血纤维蛋白在Gibco胎牛血清解冻后，也会存在于血清(例如Gibco新西兰胎牛血清10091148)中，亦可造成沉淀物。

　　(3)若您一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清，再放回冷冻，若存放于4℃时，请勿超过一个月，储存在2-8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白，可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。

　　(4)解冻Gibco胎牛血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。

　　(5)排出了Gibco血清(例如Gibco新西兰胎牛血清10091148)的原因，在考虑实验用品和无菌操作的问题。

　　(6)细菌病毒、衣原体、黑胶虫污染也很常见，如果细胞死的太多，影响较大建议更换培养液。

　　2、问：今天在配培养液时，发现Gibco血清里面有小碎片样的漂浮物，血清仍然清亮，不浑浊。不知道是什么，问了实验室的学长，说仍然可以用，但还是不放心，没有用血清。求助园子的各位达人，这可能是血清出了什么问题?我的血清用了一个月不到，四季青的。

　　答：可能的原因：(1)培养液配置时Votex不够，当时是清亮的，但过一段时间会析出来;(2)真菌污染。

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