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人B细胞连接蛋白(BLNK) ELISA 试剂盒操作说明及步骤详解
人B细胞连接蛋白(BLNK) ELISA 试剂盒操作步骤:
1)使用前,将有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物su标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9)在450nm波长处测定各孔的OD值。
ELISA 试剂实验操作说明:
1、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
2、浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
4、所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
5、有效期:6个月。
6、电子版说明书仅供参考,实际操作请按照随产品发送的印刷版说明书;中英文说明书可能会有不一致的地方,以英文说明书为准。
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