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古朵详述:蛋白提取操作步骤与储存
更新时间:2022-12-29 点击次数:409次
蛋白提取操作步骤与储存
避免蛋白降解:
总体规则:蛋白酶普遍存在,在提取蛋白质的步骤中,早些抑制,经常抑制
分装蛋白溶液,储存于不同的温度和不同的缓冲液中,测蛋白活性,找出最适储存条件。
冷藏,并加入稳定剂。这些稳定剂一般都能充分保持蛋白的生物学活性。
将蛋白溶液储于50%(V/V)的甘油或悬于硫酸铵(3.2M)中,避免冻存
冰结晶会造成物理剪切及蛋白变性。
避免酶的反复冻融,如果酶需要冻存,分装成小管后冻存。
蛋白质的储存:
蛋白样品在液氮中速冻,拿出后加入10-20%的甘油,长期储存
整个实验过程中,都要将蛋白样品置于冰上
从母管中吸取不同的蛋白时,都要用新鲜的枪头
不要将未用的溶液倒回母管
戴手套操作,避免蛋白交叉污染,或是蛋白酶的污染
避免剧烈的震荡,避免溶液中混入蛋白变性剂
实验的过程中应避免灰尘进入,灰尘包含60%的肌氨酸
操作过程中:
操作时总是小体积小量的操作,避免污染,并且动作要快
a:此类蛋白酶在活性中心包含丝氨suan和组氨suan。
b:此类蛋白酶在活性中心包含半胱氨suan(巯基,-SH-)。
c:此类蛋白酶在活性中心包含金属离子(如:n2+,Ca2+,Mn2+)。
d:此类蛋白酶在活性中心包含天冬氨酸族。
蛋白提取操作步骤与储存上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。