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小鼠ELISA试剂盒抗原C(HLA-C)酶联免疫分析说明书
小鼠ELISA试剂盒品名称:
通用名:人类白细胞抗原C(HLA-C)酶联免疫分析试剂盒
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人类白细胞抗原C(HLA-C)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人类白细胞抗原C(HLA-C)水平。用纯化的人类白细胞抗原C(HLA-C)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人类白细胞抗原C(HLA-C),再与HRP标记的HLA-C抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人类白细胞抗原C(HLA-C)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人类白细胞抗原C(HLA-C)浓度。
小鼠ELISA试剂盒标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠ELISA试剂盒操作步骤
标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为120μg/L,80μg/L ,40μg/L,20μg/L, 10μg/L)。
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混
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