【古朵生物】ELISA试剂盒的操作方法、注意事项和优势

　　ELISA Kit通称为ELISA试剂盒、酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种灵敏度高，特异性强，重复性好的实验方法，且因其试剂稳定，易保存，耗时短，操作简便，结果判断客观等优点，已被广泛应用于免疫学检验的各领域中，得到科研工作者的认可。

　　ELISA是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫分析技术。酶联免疫吸附试验的标准程序，通常是把蛋白、抗体、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗体(capture Ab)固定在固相载体上，再加入一级检测抗体(primarydetection Ab)，形成一个抗原抗体的复合物。如果该抗体已经用酶(enzyme)标记了，即可用来直接测定抗原的量，若无，则可利用另一个酶标记的二级抗体来测定抗原的量。测定抗原量的方法是加入该酶的底质(substrate)，作用后产生出现的颜色深浅和样本中的抗原量呈正比的关系，依此原理计算出样本中的抗原总量或浓度。

　　产品优势：

　　1.采用高效、灵敏、特异的抗体。

　　2.易保存、耗时短、操作简便、性价比高。

　　3.稳定的重复性和可靠性，线性范围好。

　　4.吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体。

　　5.适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种标本类型。

　　ELISA试剂盒操作方法：

　　1.标准品的稀释，请按照说明书进行操作。

　　2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

　　3.加样：不规范的移液操作可能带来误差。

　　1)空白孔，空白对照孔不加样品，sws标记的抗体，链霉亲和素-HRP，只加显色剂A&B和终止液，其余各步操作相同;

　　2)标准品孔：加入标准品50ul，链霉亲和素-HRP50ul(标准品中已事先整合好抗体，故不加);

　　3)待测样品孔：加入样本40ul，然后各加入抗NE抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul，盖上封板膜，轻轻震荡混匀，37℃温育60分钟。

　　4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

　　5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

　　6.显色：每孔先加入显色剂A50ul，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

　　7.终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

　　8.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后10分钟以内进行。

　　9.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。

　　10.仅供参考，以试剂盒内实际说明书为准。

　　Elisa试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。