【古朵生物】谷胱甘肤ELISA测定实验

　　简介:

　　谷胱甘脉的测定实验可以用于:(1)检测药品中谷胱甘脉的存在以及含量(2)谷胱甘脉具有广谱解毒作用，不仅可用于药物，更可作为功能性食品的基料，在延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤等功能性食品广泛应用

　　材料准备

　　包被液:0.05 mol (pH9.6)碳酸盐缓中液: Na2C03 0.159 g，NaHC03 0.294g，用蒸水溶解后，定容至100 ml。

　　2.PB-T洗涤液: 0.01mol/pH7.4盐-气化缓中液: Na 8.0g,KH2P0402,N2HP04 12H202.9 g,KC02g，温-200.5ml，用蒸增水溶解后，定容至1000 ml.

　　3.底物溶液3，3"，5,5-四甲基联苯胺 (TMB) 贮存液及应用液:

　　(1) 0.1 mol/l pH6.8 PBS: Na2HPO4·12H20 1.09 g,NaH2P4:H20 6.05 g,燕水溶解后定容至500 ml，4C保存备用.

　　(2)TMB贮备液: TMB 60 mg 溶于10 ml 二甲基亚硕(DMSO)中4C保存备用。

　　(3)TMB应用液: 临用前取0.1 mol pH60 PBS 10 TMB备液100l，30%H202 15ul混与即可

　　实验步骤

　　1.抗体包被

　　(1)抗体用包被液稀释至20 ug/ml，加入聚苯乙烯反应板中每孔100l，加盖后放4°C过夜

　　(2)倾去孔内液体，加入洗涤液后静置3 min，倾尽洗涤液，重复洗涤3次。

　　(3)将反应板口在吸水纸上，以除尽液体

　　2.封闭:每孔加入200ul封闭液，37°C育60 min，然后洗涤3次。

　　3.加入待测血清，37°C温育1~2h，洗涤3次。用稀释液作对照孔，标准曲线的制备是用不容稀释度的纯GST-TT。

　　加酶标抗体:按要求稀释抗GST-gG-HRP，每孔100，37°C温育1h，然后洗涤5次，扣在吸水纸上吸干水分。4

　　5显色: 加入TMB应用液，置室温反应15~30 min，加入50ul2 moll H2S04，稳定3~5 min，即可比色

　　6.比色:用酶标仪，以PBS-T孔为对照，波长450 nm，测各孔光吸收度(A)，查标准曲线，即可测得GST-T含量

　　谷胱甘肤ELISA 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。