ELISA实验：ELISA实验中缓冲溶液等试剂的配置
 

　　ELISA实验中是以抗原和抗体的免疫反应为基础，ELISA试剂以及各种溶液如何配置?最近刚做了下ELISA实验，古朵生物技术小编把各种ELISA配置方法汇总如下：

　　1、ELISA实验包被缓冲液

　　2、ELISA实验洗涤缓冲液

　　3、ELISA实验稀释液

　　4、ELISA实验终止液

　　5、ELISA底物缓冲液

　　6、ELISA实验TMB四甲基联b胺、使用液

　　7、ELISA实验ABTS使用液

　　8、ELISC

　　试剂

　　1、ELISA实验包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液)：

　　NaHCO3 1.59g

　　NaHCO3 2.93g

　　加蒸馏水至 1000ml

　　2、ELISA实验洗涤缓冲液(PH7.4 PBS)：0.15M

　　KH2PO4 0.2g

　　Na2HPO4·12H2O 2.9g

　　NaCl 8g

　　KCl 0.2g

　　Tween-20 0.05% 0.5ml

　　加蒸馏水至 1000ml

　　3、ELISA实验稀释液：

　　牛血清白蛋白(BSA) 0.1g

　　加洗涤缓冲液至 100ml

　　或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10%使用。

　　4、ELISA实验终止液(2M H2SO4)：

　　蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸98%、 21.7ml。

　　5、ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸)：

　　0.2M Na2HPO4(28.4g/L) 25.7ml

　　0.1M 柠檬酸(19.2g/L) 24.3ml

　　加蒸馏水50ml

　　6、ELISA实验TMB(四甲基联b胺)使用液：

　　TMB(10mg/5ml无水乙醇) 0.5ml

　　底物缓冲液(PH5.5) 10ml

　　0.75%H2O2 32μl

　　7、ELISA实验ABTS使用液：

　　ABTS 0.5mg

　　底物缓冲液(PH5.5) 1ml

　　3%H2O2 2μl

　　8、ELISA实验封闭液：

　　牛血清白蛋白(BSA) 5g

　　加洗涤缓冲液至 100ml

　　值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉，不适合长期保存。

　　为了保证ELISA实验的准确性，实验操作中加入的缓冲液和各组分一定要精确，将洗涤液加入酶标板中的时候防止加入的试剂混入另外一个酶标孔，严防交叉污染。

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