总结实验室常用染色液的制备方法

　　染色液是实验室中常用的试剂之一，分为天然染液和人工染料，也分碱性染料和酸性染料，以下古朵生物技术小编来详细介绍一下实验室常见染色液的配制。

　　⒈ 碘-d化钾(I2-KI)溶液 能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。

　　配方：d化钾2g ;蒸馏水300ml ; 碘1g

　　先将d化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。

　　⒉ 苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色液。

　　配方：(1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉 ; 95%酒精10ml ; 过滤后再加入10ml甘油

　　(2)先将苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。

　　(3)苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。

　　⒊ 1%醋酸洋红(aceto carmine) 酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。

　　配方：洋红1g ; 45%醋酸100ml

　　煮沸2h左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量，然后冷却过滤，加入4%铁明矾溶液1～2滴(不能多加，否则会发生沉淀)，放入棕色瓶中备用。

　　⒋ 改良苯芬品红染色液(Carbol fuchsine) 核染色剂。

　　配制步骤： 先配成三种原液，再配成染色液。

　　原液A：3g碱性品红溶于100ml 70%酒精中。

　　原液B：取原液A10ml加入到90ml 5%石炭酸水溶液中。

　　原液C：取原液B 55ml，加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林(38%的甲醛)。

　　(原液A和原液C可长期保存，原液B限两周内使用)

　　染色液：取C液10～20ml，加45%冰醋酸80～90ml，再加山l醇1~，配成10%～20%浓度的石炭酸品红液，放置两周后使用，(若立即用，则着色能力差)。

　　适用范围：适用于植物组织压片法和涂片法，染色体着色深，保存性好，使用2～3年不变质。山l醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用，假如没有山l梨醇也能染色，但效果较差。

　　⒌ 中性红(neutral red)溶液 用于染细胞中的液泡，可鉴定细胞死活。

　　配方：中性红 ;蒸馏水100ml

　　使用时再稀释10倍左右。

　　⒍ 曙红Y(伊红，eosin Y)酒精溶液 常与苏木精对染，能使细胞质染成浅红色，起衬染作用。

　　配方：曙红 ; 95%酒清100ml

　　也常用于95%酒精脱水时，加入少量曙红溶液，其目的是在包埋、切片、展片、镜检时便于识别材料。

　　⒎ 钌红(ruthenium red)染液 钌红是细胞胞间层专性染料，其配后不易保存，应现用现配。

　　配方：钌红5～10mg ; 蒸馏水25-50ml

　　⒏ 龙胆紫(gentian violet) 为酸性染料，适用于细菌涂抹制片。

　　配方：龙胆紫0.2~1 g ;蒸馏水100ml

　　⒐ 苯胺兰(aniline blue)溶液 为酸性染料，对纤维素细胞壁、非染色质的结构、鞭毛等，尤其是染丝状藻类效果好。还多用于与真曙红作双重染色，对于高等植物多用于与番红作双重染色。

　　配方：苯胺兰1 g ; 35%或95%酒精100ml

　　⒑ (phloroglucin)溶液用于测定木质素。

　　配方：5g ; 95%酒精100ml

　　注：此溶液呈黄褐色即失效。

　　⒒ 橘红G(orange G)酒精溶液 为酸性染料，染细胞质，常作二重或三重染色用。

　　配方：橘红G 1g ; 95%酒精100ml

　　⒓ 番红(safranin O)为碱性染料，适用于染木化、角化、栓化的细胞壁，对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的红色。并能与固绿、苯胺兰等作双重染色，与橘红G、结晶紫作三重染色。

　　配方：(1)番红水溶液番红0.1或1 g ;蒸馏水100ml

　　(2)番红酒精溶液番红0.5或1 g ;50%(或95%)酒精100ml

　　(3)苯胺番红酒精染色液

　　甲液 番红5 g +95%酒精50ml

　　乙液 苯胺油20ml +蒸馏水450ml

　　将甲、乙二溶液混合后充分摇均匀，过滤后使用。

　　⒔ 固绿(fast green)又称快绿溶液。为酸性染料，能将细胞质，纤维素细胞壁染成鲜艳绿色，着色很快，故要很好的掌握着色时间。

　　配方：(1)固绿酒精液固绿0.1 g ; 95%酒精100ml

　　(2)苯胺固绿酒精液固绿 1 g ;无水j精 100ml ;苯胺油 4ml

　　配后充分摇匀，过滤后使用。现配现用效果好。

　　⒕ 苏木精(hematoxylin)染液苏木精是植物组织制片中应用的染料，是苏木科植物苏木的心材提取出来的。它是很强的细胞核染料，而且可以分化出不同颜色。配方很多，现举海登汉氏(Heidenhain's)苏木精染色液，又称铁矾苏木精染色液。

　　配方：甲液(媒染剂)： 硫酸铁铵(铁明矾)2-4g ;蒸馏水100ml

　　(必须保持新鲜，最好临用之前配制)

　　乙液(染色剂)：苏木精 0.5-1g ;95%酒精 10ml;蒸馏水 90ml

　　配制步骤：(1)将苏木精溶于酒精中，瓶口用双层纱布包扎，使其充分氧化(通常在室内放置两个月后方可使用)。(2)加入蒸馏水，塞紧瓶口，置冰箱中可长期保存。

　　切片需先经甲液媒染，并充分水洗后才能以乙液染色，染色后经水稍洗再用另一瓶甲液分色至适度。

　　铁矾苏木精染液为细胞学上染细胞核内染色质好的染色剂，但要注意甲液与乙液在任何情况下决不能混合。

　　⒖亚甲基蓝染液 常用于细菌、活体细胞等的染色。

　　取亚甲基蓝，溶于100ml蒸馏水中即成。

　　⒗詹纳斯绿B(Janus green B)染色液

　　将 绿溶于100ml蒸馏水，配成饱和水溶液。用时需稀释。稀释的倍数应视材料不同而异。

　　⒘硫堇染色液

　　取克硫堇(也称劳氏青莲或劳氏紫)粉末，溶于100ml蒸馏水中，即可使用。使用此液时，需要用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片，能成多色反应。

　　18.黑色素液

　　水溶性黑素10g，蒸馏水100mL，甲醛(福尔马林)。可用作荚膜的背景染色。

　　19.墨汁染色液 国产绘图墨汁40mL，甘油2mL，液体石炭酸2mL。先将墨汁用多层纱布过滤，加甘油混匀后，水浴加热，再加石炭酸搅匀，冷却后备用。用作荚膜的背景染色。

　　20.吕氏(Loeffier)美蓝染色液

　　A液：美蓝(methylene blue,又名甲烯蓝)，95%乙醇30mL;

　　B液：。

　　混合A液和B液即成，用于细菌单染色，可长期保存。根据需要可配制成稀释美蓝液，按1∶10或1∶100稀释均可。

　　21.革兰氏染色液

　　(1)结晶紫(cristal violet)液：结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL，1%草酸铵水溶液80mL。将两液混匀置24h后过滤即成。此液不易保存，如有沉淀出现，需重新配制。

　　(2)芦戈(Lugol)氏碘液：碘1g，KI 2g，蒸馏水300mL。先将KI溶于少量蒸馏水中，然后加入碘使之溶解，再加蒸馏水至300mL，即成。配成后贮于棕色瓶内备用，如变为浅黄色能使用。

　　(3)95%乙醇：用于脱色，脱色后可选用以下(4)或(5)的其中一项复染即可。

　　(4)稀释石炭酸复红溶液：碱性复红乙醇饱液(碱性复红1g，95%乙醇10mL，5%石炭酸90mL)10mL，加蒸馏水90mL。

　　(5)番红溶液：番红O(safranine O，又称沙黄O)，95%乙醇100mL，溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中，用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。

　　以上染色液配合使用，可区分出革兰氏染色阳性(G+ )或阴性(G- )细菌，前者蓝紫色，后者淡红色。

　　22.齐氏(Ziehl)石炭酸复红液：碱性复红溶于95%乙醇10mL中为A液;溶液100mL为B液。混合A、B液即成。

　　23.姬姆萨(Giemsa)染色液

　　(1)贮存液：称取姬姆萨粉，甘油33mL，甲醇33mL。先将姬姆萨粉研细，再逐滴加入甘油，继续研磨，最后加入甲醇，在56℃放置1-24h后即可使用。

　　(2)应用液(临用时配制)：取1mL贮存液加19mLpH7.4磷酸缓冲液即成。也可以贮存液∶甲醇=1∶4的比例配制成染色液。

　　24. 1%瑞氏(Wright's)染色液

　　称取瑞氏染色粉6g，放研钵内磨细，不断滴加甲醇(共600mL)并继续研磨使溶解。经过滤后染液须贮存一年以上才可使用，保存时间愈久，则染色色泽愈佳。

　　以上就是一些目前实验室中常用染色液的配置方法。

　　染色液 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。