Elisa实验——如何选择试剂盒

　　ELISA产品选择要素

　　根据实验物种及待检样品性质来选择

　　种属：人、小鼠、大鼠、鸡、牛、猴等;

　　样本类型：血清、血浆、组织培养上清、组织或细胞裂解物。

　　根据样品中检测物水平选择

　　宽动力学检测范围：对样品种待测物水平没有任何参考数据;

　　高灵敏度试剂盒：待检物含量很低。

　　根据样本可获得性来选择

　　通常商品化试剂盒的样品用量在50μL或100μL，也有部分用量可以少至20μL。

　　供应商资质评估

　　同行口碑

　　文献引用

　　品牌历史

　　试剂盒关键技术参数

　　加标回收率

　　精密度

　　灵敏度等

　　回收率

　　将已知的低、中、高浓度的重组蛋白掺入到待测样本中，掺入前后测到的浓度增加部分与掺入浓度之比就是回收率，以此验证检测的准确度。复杂的样本基质，如血清、血浆中可能含有干扰因子，影响准确定量目标分析物。优秀的ELISA试剂盒回收率通常在80-120%之间(视为无可计量的基质干扰)，合格试剂盒在60%左右。

　　稀释线性

　　样本稀释后，最终分析物浓度应该相同，这个就是的实验线性。干扰因子会影响实验的线性，除非在研发环节克服这些干扰效应。我们为每个验证过的样本类型用试剂自带的稀释液进行系列稀释。结果用检测值和理论值的百分比表示，线性介于80-120%为理想结果。

　　精密度

　　在相同条件下，对被测量物(高、中、低浓度)进行多次反复测量，测得值之间的一致(符合)程度。这一特性具有重要意义：

　　保证一项试验中得到的结果是准确的，并且一次实验到下一次实验结果可重复;

　　判定两个结果相同还是不同。

　　通常用变异系数(coefficient of variation, CV)来表示。优秀ELISA试剂盒的酶标板内变异系数(CV)小于5%，酶标板间变异系数小于8%。

　　校准

　　每个试剂盒包含的标准品都经过高纯度蛋白的校准。联科生物标准品质量是通过与母校准品进行比较而制定。用于保证不同批次间试剂盒的一致性，所有批次的试剂盒均经过母校准品校对，不会出现结果偏差。

　　特异性

　　抗体是特异的,只与相应抗原反应。实际制备的抗体却常有非特异性反应，这是因为抗原不纯造成的。多组分抗原之间存在共同的抗原决定簇，或者两个抗原决定簇结构类似能与同一抗体结合，均可出现抗体与异源抗原的交叉反应。

　　ELISA试剂盒包含哪些组分

　　以双抗夹心法中的二步法ELISA试剂盒为例，ELISA试剂盒一般包含说明书，封板膜，预包被的酶标板，标准品，生物s被标记的检测抗体，链霉亲和素标记的HRP,显色液，终止液，检测缓冲液，标准品稀释液，洗液等十个组分。

　　ELISA试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。