对于Elisa试剂盒的原理及相关检测方法您了解多少?

　　  elisa试剂盒介绍

　　  ELISA试剂盒在国内有许多种叫法，例如：ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等，比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。 ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来，得到科研工作者的认可及推崇，在欧美及中国获得很大的推广，尤其是国内生化领域的长足发展。 Elisa生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。

　　  elisa试剂盒原理

　　  酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay，简写ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到?>聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。

　　  分类方法

　　  夹心法

　　  夹心法常用于检测大分子抗原，一般的操作步骤为：

　　  将具有专一性的抗体固著(coating)于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体;

　　  加入待测检体，检体中若含有待测的抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结;

　　  洗去多余待测检体，加入另一种对抗原专一的一次抗体，与待测抗原进行键结;

　　  洗去多余未键结一次抗体，加入带有酶的二次抗体，与一次抗体键结;

　　  洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果。

　　  间接法

　　  间接法常用于检测抗体，一般的操作步骤为：

　　  将已知的抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余的抗原;

　　  加入待测检体，检体中若含有待测的一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结;

　　  洗去多余待测检体，加入带有酶的二次抗体，与待测的一次抗体键结;

　　  洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酶呈色，藉仪器(ELISA reader)测定塑胶盘中的吸光值(OD值)，以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。

　　  竞争法

　　  竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，其操作步骤为：

　　  将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体;

　　  加入待测检体，使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结;

　　  加入带有酶的抗原，此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结，由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限，因此当检体中抗原的量越多，则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少，亦即，两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结，即所谓竞争法之由来;

　　  洗去检体与带有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色，当检体中抗原量越多，代表塑胶孔盘内留下之带有酶的抗原越少，显色也就越浅。

　　  ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。