18321664727
返回首页 在线留言 联系我们
首页 > 技术支持 > 古朵小课堂:多色免疫荧光为什么也叫做多重免疫组化?

技术支持

古朵小课堂:多色免疫荧光为什么也叫做多重免疫组化?
更新时间:2023-12-01   点击次数:682次

    古朵小课堂:多色免疫荧光为什么也叫做多重免疫组化?

 

    多色荧光免疫组化

    多靶标免疫组化研究全套解决方案

    多靶点标记技术旨在同一张切片上同时检测多个靶标分子,从而进行不同靶标之间共表达和共定位分析、丰度检测、异质性分析、细胞表型统计以及复杂的组织微环境描述等。

    该技术是基于TSA(Tyramide Signal Amplification )酪胺信号放大技术的组织切片多重标记方案,利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记,提高检测的灵敏度,大幅提高信噪比甚至达千倍以上。它可使用同一动物来源的一抗,进行同一组织切片上多种marker的荧光多重标记。同时由于具有的信号放大性能,它可将信号强度完成10-100倍的信号提升,大大提高对于弱信号及不易标记的蛋白的探测灵敏度。

    Multiplex IHC,简称mIHC,直译多重免疫组化,也叫多重荧光组化、多色免疫荧光、荧光多色标记等,到底是组化还是荧光?初次接触的人有些懵,下面就要从它的原理给大家解释下,为什么呈现的是荧光图像而同时我们又称之为组化又没错,要想充分明白这个问题,我们从以下几个方面来解释:

    1-mIHC的基本原理

    mIHC实验是基于使用酪胺-荧光基团检测开发的。其实验步骤使用序列标记策略,每轮标记包含一抗孵育和二抗孵育。随后是酪胺-荧光基团偶联物沉淀。接下来将抗体hrp剥离,或在微波炉或者高温中加热,去除样本中的抗体,所有沉淀的荧光基团,仍与样本共价结合。mIHC的基本原理:内源性过氧化物酶封闭--抗原修复--一抗孵育--hrp二抗--显色(荧光显色沉淀),由此可见,这基本就是免疫组化的经典原理;只不过mIHC重复了组化的两次(双标) 三次(三标)甚至六次(六标七色),后一步再做个负染dapi(类似于组化的苏木素负染)!

    2-为什么使用多重而非单染色IHC?

    如果您的研究方向是探索不同细胞类型之间的交互作用,或者需要评价多个生物标志物和组织的表达或共定位,可以使用mIHC实验。

    3-mIHC实验的抗体使用

    使用经过高度验证的抗体,确保得到可靠的结果。通常而言经过IHC-P验证的抗体,同样也能在mIHC中使用,但需要再进行实验步骤优化。

    上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。

 

分享到:

返回列表 | 返回顶部
上一篇 : 古朵快讯:ELISA中的试剂-免疫吸附剂    下一篇 :  如何选购人ELISA试剂盒?ELISA试剂盒的选购步骤?
网站首页 公司简介 产品中心 招聘中心 技术支持 企业动态 联系我们 管理登陆
上海古朵生物科技有限公司版权所有 主营:优质胎牛血清,EA36染色液配制,迪夫快速染色液
GoogleSitemap ICP备案号:沪ICP备19048203号-2 技术支持:智慧城市网
在线客服