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Grace昆虫培养基配制方法

点击次数:12 发布时间:2020/5/11
提 供 商: 上海古朵生物科技有限公司 资料大小:
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    Grace昆虫培养基(Grace's Insect Medium)最初设计为支持澳大利亚白星橙天蚕蛾 (Antherea eucalypti) 细胞 的生长,是对Wyatt培养基的改良,以更接近 Antherea 血淋巴。Grace用这种培养基建立了第一个连续细胞系。适 当补充添加剂后,该基本培养基已用于培养各种昆虫细胞,包括多种鳞翅类以及一些双翅类昆虫。Grace昆虫细胞培养基主要作为 培养基基础,用于培养Sf9 和Sf21细胞系,也用于其它鳞翅类昆虫细胞系的生长和维持。

    Grace's培养基(Grace’s Insect Cell Culture Medium) 是无血清培养基,使用时需要补充血清,从而为细胞提供必要的营养因子。添加5 -20%胎牛血清后,Grace昆虫细胞培养基可以用于培养多种昆虫细胞。

 

    配制方法:

    1. 用900ml组织培养级水重悬52.4g,轻轻地不断搅动使粉末完全溶解。不要加热!

    2. 加入0.35g碳酸氢钠或4.7ml 7.5% 碳酸氢钠溶液。搅动至完全溶解。

    3. 用1N KOH调节pH至6.2。用NaOH可能会导致沉淀出现。

    4. 定容至1000ml。

    5. 调节渗透压,对于鳞翅类细胞系,最适渗透压为340 - 360mOsm/KgH2O。加入0.4g KCl或0.3g NaCl到1L培养基 中可以提高10mOsm/KgH2O。加入27.8ml水到1L培养基中可以降低渗透压10mOsm/KgH2O。

    6. 用0.22μm或更小的滤膜过滤培养基。加入无菌的添加剂。分装到无菌容器中。

    7. 静止避光保存在2-8°C冰箱中。可以保存1年。

 
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