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中文名称:糖原D-PAS染色液(淀粉酶消化法) 产品规格:5×50mL/×100mL 保存:4℃避光,12个月 分类:碳水染色 用途:区分黏蛋白和多糖 注意事项:普通PAS染色法无法准确鉴别黏液物质(如黏液物质或多糖),本染色液在PAS染色之前有糖原消化步骤,需要做阳性对照。结果为:淀粉酶处理的片子糖原阴性,而对照呈红色或红紫色。 简介:糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年蕞先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色试剂盒不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。糖原D-PAS染色液的特点在于糖原PAS染色之前经淀粉酶处理,糖原消化时需要两张相同的切片,脱蜡后一张切片用含有淀粉酶的适当缓冲液处理,另一张仅用缓冲液处理。然后两张切片均用PAS法染色,消化后染色消失表明存在糖原 操作步骤(仅供参考): 1、两张相同切片,二甲苯脱蜡,梯度乙醇入水。 2、一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h。 3、流水冲洗两张切片各5~10min。 4、入过碘酸溶液,室温放置。 5、自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。 6、入SchiffReagent,置于室温阴暗处浸染。 7、自来水冲洗10min。 8、入Mayer苏木素染色液染细胞核。 9、(可选)酸性乙醇分化液分化。10、自来水冲洗,更换蒸馏水清洗使其返蓝。 11、二甲苯透明,中性树胶封固。
染色结果: 糖原、中性,唾液黏蛋白 红紫色 各种糖蛋白 红紫色 未处理的切片,糖原呈亮红色或红紫色;淀粉酶处理的切片,糖原阴性。
注意事项: 1、切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。需使用一张阳性对照片验证酶的活性。 2、过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时温度以18~22℃蕞佳。 3、酸性乙醇分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而定。 4、在过碘酸溶液和SchiffReagent中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、组织类别等决定。 |