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豚鼠红细胞使用说明书

点击次数:225 发布时间:2018/7/25
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    1. 目的Objective / Purpose
    规定豚鼠红细胞制备方法,以及外购豚鼠血细胞的管理办法,指导操作人员实验操作,保证检验结果的正确性。
    2. 适用范围Scope适用于实验使用的1%以及各浓度鼠红细胞的制备。
    3. 责任部门(人)及权限Responsible department (person)and authority
    自制豚鼠血由QC 动物实验员或活鼠供应厂家兽医负责豚鼠血采集,QC 检测人员或车间使用人员负责按照本规程进行样品豚鼠红细胞制备及使用;QC 负责人及监管人员有权对检测过程及结果进行监督检查,有权制止不符合规程的操作并向QA 提出重试请求,得到QA 批准后方可进行重试。必须开启偏差程序来解决不符合规程的操作。
    4. 定义、符号和缩略语Definition, signal andabbreviationNA
    5. 物料和设备Materials and equipment
    5.1 生理盐水:即0.85% 氯化钠溶液,取氯化钠8.5g,溶解于1000ml 纯化水即得。
    5.2 1ml 或2ml 5ml 一次性注射器,冰箱等
    5.3 阿氏液:葡萄糖2.05g,柠檬酸钠0.80g,柠檬酸0.05g,氯化钠0.42g,加蒸馏水加至100ml
    以上药品混合后加热溶化,115℃10 分钟灭菌,4℃保存,有效期半年。
    6. 规程Procedure
    6.1 豚鼠血采集:采用心脏采血法。
    6.1.1 先将鼠卧于手心保定,剪去心前区部位的被毛。
    6.1.2 压迫豚鼠,让其心脏加速以确定下针部位,对该部位使用75%酒精消毒。
    6.1.3 预先吸入约0.5~1ml 阿氏液于1 或2ml 注射器中,实验者手持有针头的注射器,在左侧第3~4 肋间,用左手食
    指摸到心搏处,右手取连有4~5 号针头的注射器,选择心搏强处穿刺,当针刺入心脏时,血液由于心脏跳动的力量自动进人注射器。
    6.1.4 一般情况下,一只成年豚鼠可采血3-5ml 血,且注意抽血时一定要缓慢。采完后要压迫止血。
    6.2 豚鼠血保存:外购豚鼠血按照供应商推荐的保存条件及有效期。自采豚鼠血与阿氏液混匀,置入15ml 离心管中,在2~8℃保存,有效期二周。
    6.3 豚鼠红细胞制备:使用前处理豚鼠血,步骤如下:
    1500rpm 离心5min,弃去上清液。加生理盐水至15ml,摇匀,1500rpm 离心5min,弃去上清液,重复两次,后一次离心10 分钟。用无菌生理盐水配制成2%或实验所需鼠红细胞悬液即得,置2~8℃备用,有效期7 天。

 
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