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小鼠血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA试剂盒

点击次数:61 发布时间:2019/4/2
提 供 商: 上海古朵生物科技有限公司 资料大小: JPG
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中文名:小鼠血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA试剂盒
英文简称:(PDGF-BB)elisa kit
试剂盒配置:96T/48T
试剂盒内有:酶标包被板、酶标试剂、标准品等
elisa试剂盒保存:2-8℃。
试剂盒有效期:6个月
检测目的:通过标准曲线计算样品血清,血浆及相关液体样本中的含量
elisa试剂盒有哪些种属:豚鼠、兔子、人、小鼠、犬、鸡、羊、猪、牛、大鼠、马、猴、各类植物等
试剂盒用于:实验室研究使用。


实验时,建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。在实验过程中,为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。实验结束后,未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。


小鼠血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)elisa检测原理优点:操作简单、快速、敏感性高、特异性强、实验设备要求简单、应用范围广泛、无放射性污染、能定性及半微量、微量、超微量定量分析,是目前应用广,发展快的酶免疫学技术方法。


实验条件的选择是很重要的,其中包括:
1、吸附均匀,吸附性好,空白值低,孔底透明度高实验条件的选择是很重要的,其中包括:
① 固相载体:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
② 包被抗体(或抗原):将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
③ 酶标记抗体工作浓度:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
④ 酶的底物及供氢体:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。

 
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