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人永生化表皮细胞如何正确使用?
发布时间:2019-11-15   点击次数:96次
     人永生化表皮细胞经过细菌、真菌、霉菌、支原体和病毒检测,表达多种神经细胞特异性标记。人永生化表皮细胞完全培养基特别添加能有效改善细胞生长状态的营养物质和针对不同物种特别甄选的培养液,适合各类原代细胞的体外培养。
  人永生化表皮细胞的冻存方法:
  1、取待冻存的细胞用胰酶消化,用培养基将细胞冲洗下来。800r/min离心5min,弃上清收集细胞。如果是悬浮培养的细胞,可直接离心收集细胞。
  2、加入适量冻存液(10%甘油+90%培养基,或是10%DMSO+90%培养基)制成细胞悬液。细胞浓度宜大,3*106个/ml左右,并可适量增加小牛血清浓度至20%。
  3、细胞悬液装入冻存管中。用胶布封裹,做好标记(注明细胞种类、时间、条件等)。
  4、冻存管在4℃下存放30min,转放-20℃1.5h~2h,再转入-70℃4~12h后即可转入液氮内(-196℃),注意进行登记。
  人永生化表皮细胞的使用方法:
  1、取一搪瓷杯盛上适量自来水加热至40℃左右。
  2、从液氮中取出冻存管立即投入40℃水中迅速解冻。
  3、取出冻存管,用75%酒精清洁管口,打开。
  4、离心去上清收集细胞,用无血清培养基洗1次,加入3ml新鲜培养基,于小培养瓶中培养。
  5、每日观察细胞生长情况,如果死细胞较多,复苏次日应换液。待细胞长满后进行传代培养。

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