发光显色试剂盒的正确操作步骤：

　　1、临用前，取适量的A1和A2，等量混合后获得Dioxetane Buffer。

　　2、按2.5mgAMPPD溶于25ml Dioxetane Buffer, 配制0.1mg/ml AMPPD底物溶液即为AMPPD Dioxetane Buffer(发色发光显迹液)，用于膜的染色。

　　3、取适量Dioxetane Buffer洗膜两次，每次15min。

　　4、对于PVDF膜进行的碱性磷酸酶反应, 膜置于新鲜配制的AMPPD Dioxetane Buffer 作用5min。

　　5、将膜移入适量的AMPPD Dioxetane Buffer中，浸泡5min(AP反应)。

　　6、取出PVDF膜，滴干水分，将膜正面朝下放在一张透明的塑料保鲜膜上，向后折叠将膜包裹起来，成为不漏水的封闭体。

　　7、在暗房中，将膜正面朝下放在感光胶片上，曝光数秒至数小时。

　　8、如需要，在室温下以适量的TBS洗膜15min。

　　9、将膜放入AMPPD Dioxetane Buffer，条带应在10～30min内出现。

　　10、用蒸馏水洗膜，终止反应。晾干后拍照留*的记录。

　　以上就是发光显色试剂盒的正确操作步骤，希望能帮助大家更好地使用发光显色试剂盒。