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甲醇酵母表达常用溶液及缓冲液的配制
更新时间:2022-12-02   点击次数:176次

  甲醇酵母表达常用溶液及缓冲液的配制

  1.毕赤酵母表达常用溶液及缓冲液的配制

  1.1 各种母液的配制

  10*YNB:(含有硫酸铵、无氨基酸的13.4%酵母基础氮源培养基) 4℃保存。34g酵母基础氮源培养基(无硫酸铵)+100g硫酸铵,溶于1000ml水中,过滤除菌。

  500*B:(0.02%生物su Biotin) 4℃保存 保存期为1年。20mg的生物su溶于100ml水中,过滤除菌。

  100*H:(0.4%Histidine 组氨suan) 4℃保存 保存期为1年。400mg的L-组氨suan溶于100ml水中,(加热至50℃以促进溶解),过滤除菌。

  10*D:(20%Dextrose 葡萄糖)保存期为1年。200g葡萄糖溶于1000ml水中,灭菌15min或过滤除菌。

  10*M:(5%Methanol 甲醇) 保存期为2个月。将5ml的甲醇与95ml水混匀,过滤除菌。

  10*GY:(10%Glycerol 甘油) 保存期为1年以上。将100ml甘油和900ml水混匀后,高压灭菌或过滤除菌。

  100*AA:(0.5% of each Amino Acid,各种氨基酸) 4℃保存 保存期为1年。分别将500mg的L-谷氨suan、L-蛋氨酸、L-赖氨酸、L-亮氨suan和L-异亮氨suan溶于100ml水中,过滤除菌。

  1M 磷酸钾溶液(potassium phosphate buffer,pH6.0),将1mol/L的K2HPO4溶液132ml与1mol/L的KH2PO4溶液868ml混匀,其pH为6.0,如需调节pH,则使用磷酸和氢氧化钾调节pH。

  1.2 常用溶液及缓冲夜

  1.2.1 碱裂解法抽提质粒DNA所用溶液:

  溶液Ⅰ:50mmol / L glucose,100mmol / L EDTA,25mmol / L Tris-HCI (pH 8.0)

  溶液Ⅱ:0.2mol/L NaOH,1% SDS(临用时配制)

  溶液Ⅲ:29.44g KAc,11.5ml Acetic acid,加ddH2O至100 ml。

  4℃保存。

  1.2.2 10% 甘油 (Glycerol):

  将100ml甘油和900ml水混匀后,高压灭菌或过滤除菌。保存期为1年以上。

  1.2.3 Rnase-H2O:

  1ul Rnase 加入1ml 灭菌 dd H2O。4℃保存。

  甲醇酵母表达常用溶液及缓冲液 上海古朵生物科技有限公司,由具有资深行业背景和丰富市场经验的专业人士组成,致力于为生命科学研究领域提供产品,为广大科研工作者提供服务。既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。产品涵盖有机试剂、无机试剂和生化试剂,标准物质、天然植物提取物及中药标准品,核酸、酶、缓冲剂、显色底物,医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。品种类超过2万种,广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。


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