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古朵生物| 蛋白酶K(Proteinase K)使用小贴士
更新时间:2023-03-22   点击次数:151次

  古朵生物| 蛋白酶K(Proteinase K)使用小贴士


  蛋白酶K在BSE的检测中用来消化PrPc,用来区别致病的PrPsc,它的正确使用对检测特异性和敏感性都有重要影响。

  概述: 蛋白酶K是一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨s蛋白酶, 具有很高的比活性。EDTA等鳌合剂或SDS等去垢剂不能使蛋白酶K失活, 该酶在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性

  来源: 源于白色念球菌(Tritirachium album)

  反应条件: 蛋白酶K在较广的缓冲液pH范围(pH 4-12.5), 温度范围(37-60℃), 盐浓度(如: 3 M GuHCl)或尿素(4 M)条件下均有活性。在一些去污剂如: Tween20(5%), Triton X-100 (1%)和SDS(1%)条件下也有活性

  比活性: 30 units/mg

  分子量: 28.9 kDa

  单位定义: 在250 μl反应体系, 37℃条件下1分钟内能分解释放相当于1 μmol酪氨s的folin-阳性氨基酸和肽所需要的蛋白酶K的量定义为一个单位(1)

  贮存条件: 20 mM Tris-HCl (pH 7.4), 1 mM CaCl2和50%甘油。贮存于-20℃

  Proteinase K,中文名为蛋白酶K。不含DNase,不含RNase,进口分装,可直接使用。可以用于消化各种蛋白。用于各种常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验,例如基因组DNA抽提、酶的消化去除等。

  酶活力,>30U/mg。在37℃,以血红蛋白为底物,1分钟内可以产生相当于1微摩尔酪氨sFolin阳性的氨基酸或多肽的蛋白酶K的量,定义为一个单位蛋白酶K酶活力。在很宽的pH范围内有-效,有-效的pH范围为pH4.0-12.5,蕞-佳pH范围为pH7.5-8.0。

  蛋白酶K的蕞-佳反应温度为65℃,但在65℃或更高的温度蛋白酶K自身的也非常迅速地降解。很多时候反应温度选择50-55℃。在0.2-1%SDS或约10mM尿素存在的情况下,蛋白酶K显示更高的酶活性。蛋白酶K的常用工作浓度为0.05-1mg/ml,根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH是否适合、温度是否适合等因素确定具体的工作浓度。常用浓度的EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、盐酸胍对蛋白酶K的活力影响不大。

   蛋白酶K 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。



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