ELISA夹心法实验步骤和注意事项

　　今天古朵技术小编和大家分享的是ELISA夹心法实验步骤以及注意事项。

　　1.包被

　　pH9.5 碳酸盐缓液稀释4D7单克隆抗体粗提γ球蛋白至1 μg/ml，加入96孔板，100 μl/孔，放4 ℃，36 小时。

　　2.封闭

　　0.1 %吐温PBS(Buffer A)冲洗96孔板三次，加3 %BSA Buffer A(Buffer B)200 μl/孔，放37 ℃，1 小时。

　　3.加待检样品

　　Buffer A 冲洗96孔板三次，加待检样品及Buffer B 稀释的标准品100 μl/孔，放37 ℃，3 小时。

　　4.加酶标抗体

　　Buffer A冲洗96孔板五次，3 %PEG Buffer A稀释酶标抗体至1∶800，加入96孔板，100 μl/孔，放37 ℃，1 小时。

　　5.显色

　　Buffer A冲洗96孔板五次，pH5.4柠檬酸缓冲液溶解底物(ABTS))，0.2 mg/ml，加3 %H2O2，2 μl/ml，加入96孔板，100 μ/孔，室温下或37 ℃显色。

　　注意事项

　　1.待检标本如为血清，应采用一次性容器，血液采集后尽快(6小时以内)分离血清。

　　2.封闭液或抗体稀释液应新鲜配制或冻存。

　　ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。