Elisa方法阳性对照品和阴性对照品区别

　　Elisa试剂盒阴性对照及阳性对照：阴、阳性对照若有正确的结果，对试剂盒操作的结果可以有粗略的判断。

　　空白对照：对ELISA试剂来说，空白对照实际上是不加标本不加酶做对照。空白对照主要测系统的吸光率。空白对照在单波长测量时显得尤其重要;

　　Q1:什么是阳性、阴性对照做实验时的阳性对照组或者阴性对照组是什么意思什么时候要设阳性对照，什么时候设阴性

　　A1:这个是根据实验组来讲的;

　　般要求实验组可能出现某种结果，这个你应该明白吧阳性对照即是100%出现该结果的“实验"组，材料是确定的;

　　阴性对照则是肯定不会出现结果的“实验组"，材料也是确定的;之所以加引号，是因为除了实验需要验证的变量，其他条件全部都是一样的，用来排除其他实验情况对结果产生的影响

　　例如，验证一转基因玉米是否有抗药性，需要选择同种的转基因成功的抗药玉米做阳性对照，无转基因的做阴性对照从而保证除了该基因其他条件一致;

　　成功的实验，通常情况下必须有阳性对照和阴性对照排除其他干扰情况

　　Q2:质粒转化的阳性和阴性对照是什么

　　A2: 阳性对照:确定连接产物已经转化到感受态细胞中 将感受态细胞进行铺板阴性对照: 仅仅将感受态细胞进行铺板

　　阳性对照品(positive control)和阴性对照品(negative control)是检验试验有效性的控制品,同时也作为判断结果的对照,因此对照品,特别是阳性对照品的基本组成应尽量与检测标本的组成相一致.以人血清为标本的测定,对照品也为人血清,因为正常人血清在各种ELISA模式中可产生不同程度的本底.由于大量正常人血比较难得到,elisa试剂盒国外试剂盒中的对照品多以复钙人血浆(recalcified human plasma)为原料,即在血浆中加入钙离子,使其中的纤维蛋白质凝固,除去凝块后所得的液体,其组成与血清相似.阴性对照品须先行检测,确定其中不含待测物质.例如HBsAg检测的阴性对照品中不可含HBsAg,抗HBs也是阴性.阳性对照品多以含蛋白保护剂的缓冲液为基质,其中加入一定量的待检物质,此量在试剂说明书中标明.加入的量应与试剂的敏感度相称,在测定中得到的吸光值与受检标本吸光值比较,可对标本中受检物质的量有一个粗略的估计.ELISA试剂盒国外检测HBsAg的检测敏感度约为0.5ng/ml,阳性对照品中含量约为10ng/ml.在对照品中一般加入抗生素(antibiotic)和防腐剂,以利保存.

　　ELISA试剂盒定量测定的(例如甲胎蛋白质癌胚抗原测定等)应含有制作标准曲线用的参考标准品,应包括覆盖可检测范围的4-5个浓度,一般均配入含蛋白保护剂及防腐剂的缓冲液中. ELISA试剂盒阴性对照及阳性对照：阴 阳性对照若有正确的结果,对试剂盒操作的结果可以有粗略的判断.空白对照：对ELISA试剂来说,空白对照实际上是不加标本不加酶做对照.空白对照主要测系统的吸光率.空白对照在单波长测量时显得尤其重要.

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