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ConA-琼脂糖凝胶4B

  • 型   号:
  • 更新时   间:2022-05-26
  • 价   格:

ConA-琼脂糖凝胶4B,适用范围:用于各种带甘露醇及葡萄糖残基的糖、糖蛋白、糖脂的分离纯化。

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ConA-琼脂糖凝胶4B由上海古朵生物供应,我们所供应的琼脂糖凝胶系列特别多,价格也很便宜,如有需要,欢迎订购!为了满足客户的需求,我们还配有ELISA试剂盒,标准品对照品,动物血清,培养基,抗体,抗原,生化试剂,化学试剂,生物分子,溶液,实验耗材及其他试剂销售。

 

中文名:ConA-琼脂糖凝胶4B
英文名:ConA Sepharose 4B
供应商:古朵生物
规格:25ml、100ml
操作温度:4-40℃
结构成分:4%交联琼脂糖
配基偶联量:40μmol phenyl/ml 凝胶
保存条件:4℃
性状:白色微球,凝胶状,保存在20%酒精溶液中
应用:疏水层析介质,适合含芳香族配体蛋白纯化,特别适合单抗的纯化等
适用范围:用于各种带甘露醇及葡萄糖残基的糖、糖蛋白、糖脂的分离纯化。
作用:是将伴刀豆球蛋白(ConA)偶联到交联及活化的琼脂糖凝胶上,该填料具有很高的化学稳定性。ConA能和各类带甘露醇及葡萄糖残基的糖、糖蛋白、糖脂,所以ConA琼脂糖凝胶可以用于这类物质的分离纯化。


使用方法:
1、乙醇浸泡:在室温下,将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时,并不断搅拌以保证凝胶溶胀,用无盐水洗去残存的乙醇滤干。
2、无盐水浸泡:室温下,在无盐水中充分溶胀24小时,间隙搅拌,以保证凝胶的*溶胀。
3、盐酸浸泡:在常温下再用0.2NHCl浸泡12小时,间隙搅拌,滤干,水洗只中性。
4、将溶胀好的凝胶脱气后(真空抽滤或超声波)根据装柱要求一次性置入柱内,注意保持湿态装柱,并避免柱内产生气泡或断层。
5、上样前平衡层析柱至少3-5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值)。
6、胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱高控制在40-50cm以下,过高的凝胶层会引起较大的反压,应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制,脱盐时高径比为5:1即可。
7、洗脱方法:可以用无盐水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以*分离纯化。
8、在位清洗(CIP)凝胶使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。

 

 

注意事项:
1、该凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温,然后再装柱,以免产生气泡影响柱效。
2、吸附:10-30Tris-HCl缓冲液,pH7.5,其中含有0.2MNaCl,2mMMnCl2,2mMCaCl2。平衡10个柱子床体积。
3、洗脱:可以用pH4.5-6的缓冲液洗脱,也可以用100-500mM糖类竞争线性或阶段洗脱,例如用甲基葡萄糖等甲基吡喃糖,其中缓冲液可以是10-30Tris-HCl缓冲液,pH7.5,含有0.2MNaCl.洗脱zui多可以到10个柱床体积。
4、上样样品必须与平衡柱子的缓冲液pH、电导相同。
5、ConA琼脂糖凝胶FF亲和填料的再生处理方法:先用0.1MTris-HClpH8.5缓冲液洗含0.2MNaCl洗10个柱床体积,然后用20mM醋酸缓冲液,pH4.5洗3个床体积,zui后用20%乙醇洗3个床体积即可。
6、对于吸附力强的物质可以用0.1M硼酸盐缓冲液,pH6.5低流速洗3-5个柱床体积。也可以用乙醇线性洗脱20-50%。
7、该亲和填料保存条件为20%乙醇,+4~8℃。

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