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  鉴定单克隆抗体的性质有哪些方法？

  鉴定单克隆抗体的性质，上海古朵生物详细解说：当获得多个杂交瘤细胞株时，要了解哪一株是，则一定要通过各种鉴定。常见的方法有：

  (一)Ig类型测定

  通常以免抗小鼠Ig类及亚类抗体与培养液中单克隆抗体按双向琼脂扩散法进行测定，确定其Ig类型或Ig亚类型别。

  (二)特异性测定

  把与相应抗原有关的物质同McAb进行多种免疫学检测，鉴定McAb的特异性。这直接关系到McAb应用的可靠性。

  (三)抗体效价测定

  效价以腹腔积液或培养液的稀释度表示，稀释度越高，则抗体效价也越高。在凝集反应中，腹腔积液效价可达5万以上;在ELISA中，腹腔积液效价可达100万以上。如ELISA效价低于10万，用于诊断测定将不会达到很高的敏感度，应重新制备。

  (四)表位测定

  通过双向琼脂扩散法，把两种McAb混合，加入于同一孔中，对孔放相应的抗原，如出现两条沉淀线可证明两者为抗不同表位的McAb;利用ELISA双抗夹心法，将一种McAb作包被抗体，另一作酶标记，其中加入抗原，如显色，则证明两者抗不同的表位。

  (五)亲和力测定

  只有当抗原与抗体结合部位结构吻合时，抗体的亲和力。这种结合力以抗原抗体反应平衡时，抗原与抗体浓度的乘积与抗原抗体复合物浓度之比表示。如亲和力太低，会严重影响测定的敏感性。

  (六)染色体分析

  正常鼠的脾细胞染色体数：40，全部为端着丝粒;小鼠骨髓瘤细胞染色体：SP2/0细胞为62—68，NS-1为54～64。大多数为非整倍性，有中部和亚中部着丝点。杂交瘤细胞的染色体数目接近两亲本细胞染色体数目的总和，在结构上多数为端着丝粒染色体外.还应出现少数标志染色体。染色体数目多且较集中的杂交瘤细胞分泌高效价的抗体。

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