Q-琼脂糖凝胶HP使用方、用途、注意事项

　　中文名：Q-琼脂糖凝胶HP

　　英文名：Q Sepharose HP

　　规格：100ml、500ml

　　颗粒大小：34μm

　　凝胶类型：离子交换填料，强碱型

　　基质：6% 交联琼脂糖凝胶

　　性状：白色微球,凝胶状，保存在20%酒精溶液中。

　　应用：利用离子交换作用，应用于蛋白等生物分子的精细纯化等。

　　Q-琼脂糖凝胶HP

　　Q-琼脂糖凝胶HP使用方法

　　1、乙醇浸泡：在室温下，将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时，并不断搅拌以保证凝胶溶胀，用无盐水洗去残存的乙醇滤干。

　　2、无盐水浸泡：室温下，在无盐水中充分溶胀24小时，间隙搅拌，以保证凝胶的*溶胀。

　　3、盐酸浸泡：在常温下再用0.2NHCl浸泡12小时，间隙搅拌，滤干，水洗只中性。

　　4、将溶胀好的凝胶脱气后(真空抽滤或超声波)根据装柱要求一次性置入柱内，注意保持湿态装柱，并避免柱内产生气泡或断层。

　　5、上样前平衡层析柱至少3-5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值)。

　　6、凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在1-2%的床体积，视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积，柱高的选择也与分离要求相关，柱高控制在40-50cm以下，过高的凝胶层会引起较大的反压，应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制，脱盐时高径比为5：1即可。

　　7、洗脱方法：可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以*分离纯化。

　　8、在位清洗(CIP)凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。

　　Q-琼脂糖凝胶HP注意事项

　　1、密封贮存于4°C-28°C(保存溶液为20%乙醇)，通风、干燥的地方，不能冷冻;用过的柱子贮存于4°C(20%乙醇)。

　　2、在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。

　　3、在实验过程中，请严格遵循产品说明书上的要求进行操作。

　　Q-琼脂糖凝胶HP用途

　　1、可用氢氧化钠在位清洗;基质的亲水特性保证在洗脱过程中减少细胞衍生杂质的非特异性吸附。

　　2、可用于蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。

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