实验技巧：ELISA实验中缓冲溶液及试剂的配置要求

　　elisa实验中是以抗原和抗体的免疫反应为基础，ELISA试剂以及各种溶液如何配置?zui近刚做了下ELISA实验，把各种ELISA配置方法汇总如下：(1)　ELISA实验包被缓冲液(2)　ELISA实验洗涤缓冲液(2)　ELISA实验洗涤缓冲液(3)　ELISA实验稀释液;(4)ELISA实验终止液(5)ELISA底物缓冲液(6)ELISA实验TMB(四甲基联苯胺)使用液(7)　ELISA实验ABTS使用液(8)ELISC。古朵生物为您具体解析：

　　试剂

　　(1)　ELISA实验包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):

　　NaHCO3 1.59克

　　NaHCO3　 2.93克

　　加蒸馏水至1000ml

　　(2)　ELISA实验洗涤缓冲液(PH7.4 PBS)：0.15M

　　KH2PO4 　　 　0.2克

　　Na2HPO4·12H2O　　2.9克

　　NaCl　　　 　　8.0克

　　KCl　　　 　0.2克

　　Tween-20　0.05%　 0.5ml

　　加蒸馏水至1000ml

　　(3)　ELISA实验稀释液：

　　牛血清白蛋白(BSA) 0.1克

　　加洗涤缓冲液至100ml

　　或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10%使用。

　　(4)　ELISA实验终止液(2M　H2SO4)：

　　蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。

　　(5)　ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):

　　0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml

　　0.1M 柠檬酸(19.2克/L)　　 24.3ml

　　加蒸馏水50ml。

　　(6)　ELISA实验TMB(四甲基联苯胺)使用液:

　　TMB(10mg/5ml无水乙醇) 0.5ml

　　底物缓冲液(PH5.5)　　 10ml

　　0.75%H2O2 32μl

　　(7)　ELISA实验ABTS使用液:

　　ABTS　　　0.5mg

　　底物缓冲液(PH5.5)　 1ml

　　3%H2O2 2μl

　　(8)ELISA实验封闭液：

　　牛血清白蛋白(BSA) 5克

　　加洗涤缓冲液至100ml。

　　值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉，不适合长期保存。

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　　为了保证ELISA实验的准确性，实验操作中加入的缓冲液和各组分一定要，将洗涤液加入酶标板中的时候防止加入的试剂混入另外一个酶标孔，严防交叉污染。

　　ELISA实验上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。