冰冻切片组织三磷酸腺苷酶活性染色试剂盒

　　产品说明书

　　主要用途

　　冰冻切片组织三磷酸腺苷酶(ATP酶)活性染色试剂是一种旨在使用钙激活技术，在碱性条件下，由三磷酸腺苷酶催化水解产生的磷酸与钙离子结合，经过氯化钴的替换，zui后在硫化铵存在的情况下，呈现组织样本中酶活性部位的棕黑色沉淀现象的而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心改良、成功实验证明的。主要适用于动物组织冰冻切片的酶活性检测。也可用于人体肌肉组织纤维的分型鉴定。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，灵敏牢固，显色清晰。

　　三磷酸腺苷酶或ATP酶(adenosinetriphosphatase;ATPase)可催化ATP水解生成ADP及无机磷的反应，这一反应放出大量能量，用于运送离子进出细胞，同时供给生物体进行需能生命过程。它存在于生物细胞的多个部位，比如细胞质膜上和叶绿体类囊体膜上等，对整个生命的维持有着重要的作用。膜结合ATP酶存在多种形式：钠钾ATP酶、胞膜钙泵ATP酶(plasma membrane calcium ATPase;PMCA)或肌质网/内质网钙泵ATP酶(sarcoplasmic or endoplasmic reticulum calcium ATPases;SERCA)、氢钾ATP酶(hydrogen/potassium ATPase)或胃质子泵(gastric proton pump)等。

　　产品内容

　　碱性液(Reagent A) 毫升

　　反应液(Reagent B) 毫升

　　激活液(Reagent C) 毫升

　　置换液(Reagent D) 毫升

　　清理液(Reagent E) 毫升

　　显色液(Reagent F) 毫升

　　产品说明书 1份

　　保存方式

　　保存反应液(Reagent B)在-20℃冰箱里，避免反复冻融，避免光照;其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月

　　用户自备

　　培养箱：用于反应孵育

　　小型染色缸：用于染色清洗操作

　　光学显微镜：用于染色后观察分析1或

　　酶法冰冻切片人体肌肉组织分型染色试剂盒

　　酶法冰冻切片动物肌肉组织分型染色试剂盒

　　实验步骤

　　实验开始前，将试剂盒里的反应液(Reagent B)从-20℃的冰箱里取出，放进冰槽里融化，避免光照。然后进行下列操作： 一、 样本激活处理

　　1.取出待测的 5 至 10 微米厚的冰冻组织切片(注意：参见注意事项 3 和 4)

　　2.小心加上 xx 微升 碱性液(Reagent A)在切片上，铺满整个样品表面

　　3.小心移去 碱性液(Reagent A)

　　4.小心加上 xx 微升 反应液(Reagent B)，铺满整个样品表面

　　5.放进 37℃培养箱里，孵育 30 分钟

　　6.小心移去 反应液(Reagent B)

　　7.小心加上 xx 微升 激活液(Reagent C)，铺满整个样品表面

　　8.室温下孵育 2 分钟

　　9.小心移去激活液(Reagent C)

　　10.重复实验步骤 7 至 9 二次

　　二、样本染色处理

　　1. 小心加上xx微升置换液(Reagent D)，铺满整个样品表面

　　2. 室温下孵育2分钟

　　3. 小心移去置换液(Reagent D)

　　4. 室温下，小心将切片置入50毫升清理液(Reagent E)中孵育1分钟

　　5. 小心移去切片上的清理液(Reagent E)

　　6. 小心加上xx微升显色液(Reagent F)，铺满整个样品表面

　　7. 室温下孵育30至60秒;或直至可见棕黑色

　　8. 小心移去显色液(Reagent F)

　　9. 室温下，小心将切片置入xx毫升清理液(Reagent E)中孵育2分钟

　　10.小心移去切片上的清理液(Reagent E)

　　三、 (选择步骤)样本复染处理

　　1. 样本复染处理(苏木素)

　　2. 放上盖玻片或封片

　　3. 即刻在一般光学显微镜下观察：酶活性阳性部位呈现深浅不一的棕黑色(如果复染，则细胞核为蓝色)

　　注意事项

　　1. 本产品为50次操作

　　2. 操作时，须带手套

　　3. 建议组织快速冷冻，避免切片冰晶形成

　　4. 冰冻切片不可固定处理

　　5. 试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面

　　6. 本产品可以用于鉴定人体肌肉纤维I型和II型：浅染为I型;深染为II型。如果需要进一步鉴定亚型或动物肌肉纤维分型，建议使用

　　7. 组织细胞染色注意不要过度

　　8. 可以使用有机溶剂(乙醇、二甲苯等)脱水、澄清处理后封片

　　9. 组织细胞染色完成后，即刻进行光学显微镜观察

　　10.本公司提供系列组织细胞酶活性染色试剂产品

　　质量标准

　　1. 本产品经鉴定性能稳定

　　2. 本产品经鉴定显色清晰

　　染色试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。古朵试剂盒