不同动物elisa试剂盒如何进行校准?

　　造成动物elisa试剂盒检测数据不一样的原因，除了一些实验操作、实验环境等客观因素外，还有试剂盒质量参数，如重复率、板内差、板间差、线性稀释、回收率等。

　　但是，重要的影响因素可能是作为检测标尺的标准品。接下来，通蔚生物就揭晓影响不同elisa试剂盒检测数据的差异和关于标准品的几个疑惑。

　　一、不同的动物elisa试剂盒如何进行校准?

　　1、国际标准物进行校准：目前，elisa试剂盒比较好的校准方法为应用NIBSC/WHO推荐的标准品对试剂盒进行校准。

　　2、高质量的原料进行校准：elisa试剂盒的检测指标种类可能远远多于NIBSC/WHO推荐的标准品，有时需要依靠高质量的elisa试剂盒原料。

　　目前，进口原料依然是生产高质量elisa试剂盒的前提条件之一，但是不同品牌的蛋白表达体系和质控标准不同，可能会导致原料的性能不同，进而造成检测数据的差异。

　　3、严谨的生物样本进行验证：随着国内生物技术的发展，自主研发蛋白表达、抗体制备、elisa试剂盒开发技术也在不断进步。

　　除了应用NIBSC/WHO推荐的标准品对试剂盒进行校准外，也可用一些暂无机构认可的生物样本进行验证，按照科学研究方法，对种属、性别、生命周期阶段、种类等因素划分所得到的生物样本进行验证。

　　二、elisa试剂盒的标准品如何使用?

　　如果动物elisa试剂盒的标准品是重组蛋白，请提前20-30分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温(18-25℃)，如果试剂盒需分多次使用，请仅取出本次实验所需的酶标板条和试剂，剩余板条和试剂需按照条件保存。

　　标准品工作液的配制：将标准品的冻干粉末尽量集中到西林瓶或离心管底部，加入标准品/样品稀释液至冻干标准品中，室温水平静置10分钟，让重组蛋白恢复其空间构象，然后上下颠倒数次，待其充分溶解后，轻轻混匀，避免起泡，然后进行分装和使用即可。

　　标准品的保存和弃用：如果1个月内使用，动物elisa试剂盒标准品可以暂存于4℃;如果1个月以上不用，标准品必须保存于-20℃以下环境;已配制好的标准品工作液如有剩余液体请切记要弃用，标准品工作液一定要现配现用。

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